Volumen. 5, Nº 8, junio - noviembre 2021, pp. 62 - 71  
Comparación estadísꢀca de métodos de extracción para determinar  
cadmio en granos de cacao  
Johanna Soꢁa Utreras-Peñafiel1*; Iván Luis Tapia-Calvopiña2;  
Luis Ramos-Guerrero3  
(Recibido: enero 19, Aceptado: mayo 25, 2021)  
hꢂps://doi.org/10.29076/issn.2602-8360vol5iss8.2021pp62-71p  
Resumen  
El monitoreo de la concentración de cadmio en granos de cacao es indispensable debido al potencial efecto sobre  
la salud de los consumidores. Esta invesꢀgación ꢀene como objeꢀvo desarrollar un método de extracción adecuado  
para la determinación de cadmio en granos de cacao mediante el uso de tres técnicas de extracción con digesꢀón  
ácida de las muestras: I) HNO3 concentrado, II) HNO3-HCLO4, y III) HNO3-HCL (agua regia) y la posterior cuanꢀꢁcación  
decadmiomedianteespectrofotometríadeabsorciónatómicaenllama.Elanálisisdevarianzadelasconcentraciones  
de cadmio obtenidos demostró que existe diferencia signiꢁcaꢀva entre los métodos de extracción aplicados y que  
la técnica III es la más eꢁciente para extraer el cadmio de los grados de cacao. Así mismo, se evaluaron varios  
parámetros de desempeño del método desarrollado como la veracidad (ensayos entre laboratorios), precisión  
(repeꢀbilidad y reproducibilidad), linealidad, límite de cuanꢀꢁcación, límite de conꢁanza, rango de trabajo, los  
cuales permiꢀeron evidenciar que los resultados de cadmio obtenidos por el método desarrollado son exactos y  
adecuados para el propósito.  
Palabras Clave: cadmio; contaminación de alimentos; desempeño del método; espectrofotometría de absor-  
ción atómica; granos de cacao; Theobroma cacao lineo.  
Staꢀsꢀcal comparison of extracꢀon methods to determine cadmium in  
cocoa beans  
Abstract  
Monitoring the concentraꢀon of cadmium in cocoa beans is essenꢀal due to the potenꢀal effect on the health of  
consumers. This research aims to develop a suitable extracꢀon method for the determinaꢀon of cadmium in cocoa  
beans by using three extracꢀon techniques with acidic digesꢀon of the samples: I) Concentrated HNO3, II) HNO3-  
HClO4 and III) HNO3- HCl and subsequent cadmium quanꢀꢁcaꢀon by flame atomic absorpꢀon spectroscopy. The  
analysis of variance of the cadmium concentraꢀons obtained showed that there is a signiꢁcant difference between  
the extracꢀon methods applied and that III one is the most efficient to extract cadmium from cocoa beans. Likewi-  
se, several performance parameters of the developed method were evaluated, such as precision (repeatability and  
intermediate precision), linearity, quanꢀꢁcaꢀon limit, conꢁdence limit, working range, which allowed to show that  
the cadmium results obtained by the developed method are reliable and ꢁt for the purpose.  
Keywords: cadmium; contaminaꢀon of food; method performance; atomic absorpꢀon spectrophotometry;  
cocoa beans; Theobroma cacao lineo.  
1. Química de Alimentos, Maestrante Universidad Estatal de Milagro, UNEMI, Ecuador. Email: johaup612@gmail.com. hꢂps://  
orcid.org/0000-0002-6120-3202  
2. MSc, Docente de la Universidad Central del Ecuador, Ecuador. Email: ivan_tapia_c@hotmail.com. hꢂps://orcid.org/0000-  
0001-9305-4793  
3.  
Dr. en Química, Invesꢀgador del Centro de Invesꢀgación de Alimentos - CIAL, Universidad Tecnológica Equinoccial, UTE,  
Ecuador. Email: luis.ramos@ute.edu.ec. hꢂps://orcid.org/0000-0003-2654-3989  
* Autor de correspondencia  
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46056 62  
INTRODUCCIÓN  
Normalización (INEN), consciente de los efectos  
El Ecuador es el principal exportador de cacao del cadmio en la salud y de la importancia que  
fino de aroma del mundo, actualmente cubre representa el cacao al país, realizó el proceso  
más del 60% de este mercado [1] [2] y sus de cerꢀficación del “Material de Referencia  
principales compradores son Indonesia, EEUU, de Cadmio, en polvo de almendra de Cacao”,  
Malasia, Holanda, México, Alemania, China, con el cual se inicia la cadena de trazabilidad  
Bélgica, Canadá y Japón [3]. Sin embargo, las metrológica para garanꢀzar que los laboratorios  
exportaciones de cacao fino de aroma del nacionales que realizan el ensayo, puedan  
Ecuador, especialmente hacia los mercados avalar la calidad de sus mediciones y confirmar  
europeos, se ve amenazado por el reglamento que cumplen especificaciones normaꢀvas  
UE N° 488/2014 expedido el 12 de mayo del reglamentarias y no sean objetables, con lo  
2014, en el cuál se colocó límites al contenido cual se brindará la confianza necesaria para la  
de cadmio en productos elaborados con cacao.  
El cadmio es un metal pesado, cuya principal técnicos del INEN ejecutaron un ensayo de  
fuente de transferencia es el suelo; su presencia apꢀtud LNM-EA-2019-01 “Determinación  
apertura de mercados internacionales. Además,  
en los suelos agrícolas puede depender de de cadmio en cacao” con laboratorios que  
varios factores ya sean geogénicos; es decir, que realizan este ensayo, con lo cual estos validarán  
su presencia se da de forma natural debido a sus métodos de medición y optarán por la  
ceniza volcánica; o puede ser antropogénica, es acreditación en caso de que así lo requieran [4].  
decir, que su presencia en los suelos se da por  
incidencia humana ya sea por la uꢀlización de Antecedentes  
ferꢀlizantes y/o abonos enriquecidos en cadmio, Esta invesꢀgación tomó como base fundamental  
minería o riego con agua contaminada. Muchos dos documentos, el primero ꢀtulado “Avances  
alimentos ꢀenden a absorberlo y a retenerlo del monitoreo de presencia de cadmio en  
como es el caso de las plantas, entre las cuales almendras de cacao, suelos y aguas en Ecuador”  
se encuentra el cacao.  
trabajo que fue efectuado por Francisco  
Tomando en cuenta que el Ecuador es uno Mite, Manuel Carrillo y Wellings Durango en  
de los mayores exportadores de cacao en el el 2009, del Insꢀtuto Nacional Autónomo de  
mundo y considerando la contaminación que Invesꢀgaciones Agropecuarias (INIAP) Estación  
el cadmio puede tener sobre los culꢀvos del Experimental Tropical Pichilingue Departamento  
mismo, la Agencia de Regulación y Control Fito Nacional de Manejo de Suelos y Aguas. Este  
y Zoosanitario –AGROCALIDAD desde el año trabajo aplica el método de digesꢀón ácida con  
2012 se encuentra realizando invesꢀgaciones solución nítrica perclórica y digesꢀón ácida con  
sobre la presencia de cadmio en los granos de agua regia procedimientos que permiꢀeron  
cacao, con las cuales se podrá determinar los determinar niveles de cadmio en suelos y tejidos  
niveles máximos de residuos (LMR’s) de cadmio respecꢀvamente [5]. El segundo documento en  
presente en el cacao nacional de exportación.  
el que se basó este trabajo fue una invesꢀgación  
Por otro lado, ante la falta de un método realizada por el Insꢀtuto Federal de Evaluación  
estandarizado para la extracción de cadmio en de Riesgos (BFR por sus siglas en alemán) en el  
almendras de cacao, se requiere el desarrollo 2011 ꢀtulado “El Insꢀtuto Federal de evaluación  
de un método, el mismo que será uꢀlizado en el de Riesgos (BFR) propone el establecimiento de  
laboratorio de bromatología de AGROCALIDAD.  
límites para el cadmio en los chocolates”, el cual  
En el 2019, la Normaꢀva Europea establece que indica que el Ministerio Federal de Alimentos,  
el LMR´s para granos de cacao es de 0,6 a 1,2 mg Agricultura y Protección al Consumidor (BMELV  
Cd.Kg-1, estos límites aún se encuentran sujetos por sus siglas en alemán) pide al BFR que valore  
a cambio ya que ciertos países aún no norman el riesgo respecto al tema de “cadmio en cacao  
la canꢀdad de cadmio presente en su cacao y chocolate” [6]. Revisan los límites europeos de  
como materia prima. El Servicio Ecuatoriano de metales pesados en alimentos; y exponen que  
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el componente esencial del chocolate son los fecha la técnica más ampliamente uꢀlizada para  
granos de cacao, los mismos que pueden tener determinar elementos metálicos y metaloides.  
diferentes canꢀdades de cadmio dependiendo Estas técnicas ꢀenen grandes ventajas y es de  
del país de donde provengan.  
costo relaꢀvamente bajo, pudiéndose aplicar tal  
técnica a una gran variedad de muestras.  
MARCO CONCEPTUAL  
Métodos Instrumentales. Los métodos Digesꢀón ácida para la determinación de  
instrumentales se basan en la medida de metales. Para realizar la determinación de  
propiedades ꢁsicas que pueden uꢀlizarse como metales por absorción atómica de llama, es  
señales analíꢀcas en el análisis cualitaꢀvo necesario tener los analitos en solución, y  
o cuanꢀtaꢀvo, su uso ha aumentado con el libres de posibles interferentes, tales como  
desarrollo de la electrónica por la facilidad de materia orgánica, o parꢀculado. Para lograr  
detectar cambios en las propiedades ꢁsico- estas condiciones, y con el objeto de reducir  
químicas y transformarlos a un lenguaje la interferencia por materia orgánica y liberar  
entendible por el ser humano. Existen varios los metales de la matriz manteniéndolos en  
ꢀpos de métodos instrumentales, en la mayor solución, es necesario el tratamiento previo de  
parte de ellos se requiere de una fuente de las muestras, y se debe realizar el procedimiento  
energía para esꢀmular una respuesta medible de preparación, digesꢀón y preservación. Estos  
que procede del analito [7].  
tratamientos se realizan según el ꢀpo de matriz  
[9].  
Espectrofotometría. La Espectrofotometría es el La digesꢀón de las muestras consiste en una  
método de análisis que se basa en la medición mineralización húmeda. Para esto se uꢀlizan  
de la radiación electromagnéꢀca emiꢀda o ácidos concentrados y calentamiento, es así que  
absorbidaporlosanalitos.Todoanalitomolecular en la mayoría de casos la digesꢀón es llevada a  
es capaz de absorber ciertas longitudes de onda cabo con ácido nítrico, ya que es adecuado para  
de la radiación electromagnéꢀca. Dicha energía la extracción de diversos metales, sin embargo,  
es transferida temporalmente a la molécula y algunas muestras necesitan de la adición de  
como consecuencia, disminuye la intensidad de diferentes ácidos fuertes tales como el ácido  
radicación [7].  
perclórico,ácidosulfúricooácidoclorhídricopara  
producir una digesꢀón ácida lo suꢂcientemente  
Espectrofotometría de absorción atómica. agresiva para lograr una digesꢀón completa.  
Espectrofotometría de absorción atómica Para las digesꢀones se puede uꢀlizar:  
(E.A.A.), es un método analíꢀco que permite  
idenꢀꢂcar los elementos presentes en la materia Ácido nítrico. Es un líquido incoloro que se  
y su concentración. Este método consiste en descompone lentamente por la acción de la luz,  
la medición de las especies atómicas por su adoptando una coloración amarilla por el NO2  
absorción a una longitud de onda parꢀcular. La que se produce en la reacción. El ácido nítrico es  
especie atómica se logra por atomización de la uno de los más fuertes desde el punto de vista  
muestra, siendo los disꢀntos procedimientos iónico. Pero lo que lo caracteriza químicamente  
uꢀlizados para llegar al estado fundamental es su energía de acción oxidante.  
del átomo lo que diferencia las técnicas y  
accesorios uꢀlizados. La técnica de atomización Solución Nítrico-Perclórica. Está formada por  
más uꢀlizada es la de absorción atómica por la mezcla de cuatro partes de ácido nítrico y  
flama o llama, que nebuliza la muestra y luego un parte ácido perclórico en volumen [10].  
la disemina en forma de aerosol dentro de una Esta solución por la acción del ácido nítrico es  
llama de aire con aceꢀleno u óxido nitroso- un fuerte oxidante y por el ácido perclórico es  
aceꢀleno [8].  
adecuado para la destrucción de materia, sin  
La Absorción Atómica (AA) en llama es a la embargo, se debe tener cuidado cuando se  
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uꢀliza este reacꢀvo por la tendencia del ácido exclusivamente a la especie Theobroma cacao  
perclórico a reaccionar de forma explosiva con Lineo perteneciente a la familia Sterculiaceae  
la materia orgánica.  
del género Theobroma. Una mazorca de cacao  
ꢀene una corteza rugosa de casi 4 cm de espesor.  
Agua Regia. El agua regia es una solución Está rellena de una pulpa rosada viscosa, dulce  
altamente corrosiva y fumante, de color y comesꢀble, que encierra de 30 a 50 granos  
amarillo, formada por la mezcla de ácido nítrico largos (blancos y carnosos) acomodados en filas  
concentrado y ácido clorhídrico concentrado en en el enrejado que forma esa pulpa. Los granos  
la proporción de una a tres partes en volumen del cacao ꢀenen la forma de las judías: dos  
[11].  
partes y un germen rodeados de una envoltura  
Es uno de los pocos reacꢀvos que son capaces rica en tanino. Su sabor en bruto es muy amargo  
de disolver el oro, el plaꢀno y el resto de los y astringente [13].  
metales. Fue llamada de esa forma porque La mayoría de las plantaciones de cacao se  
puede disolver aquellos llamados metales encuentran en las proximidades de la línea  
regios, reales, o metales nobles. Es uꢀlizada en el ecuatorialyabajaalꢀtud.Requieretemperaturas  
aguafuerte y algunos procedimientos analíꢀcos. medias anuales elevadas con fluctuaciones  
El agua regia no es muy estable, por lo que debe pequeñas y una gran humedad. Generalmente  
ser preparada justo antes de ser uꢀlizada.  
el cacao se culꢀva buscando un auto sombraje  
que sirve como una cubierta que lo protege de la  
Metales pesados como contaminantes insolación directa y de la evaporación. Su culꢀvo  
tóxicos. Los metales pesados son considerados requiere una temperatura máxima y mínima de  
peligrosos debido a que no presentan una forma 30-32°C y 18-21°C, respecꢀvamente [13].  
de degradación ꢁsica, química o biológica,  
así también a la bioacumulación que pueden Parámetros Estadísꢀcos. Se describe algunos  
presentar durante largos periodos de ꢀempo. de los criterios cuanꢀtaꢀvos que se pueden  
Los metales pesados pueden ser retenidos en uꢀlizar para decidir si un determinado método  
el suelo y luego absorbido por plantas mediante instrumental es o no adecuado para resolver  
adsorción en la superficie de las parꢂculas un problema analíꢀco. Estás caracterísꢀcas se  
minerales, formación de complejos con las expresan en términos numéricos y se denomina  
parꢂculas orgánicas y úlꢀma instancia por parámetros de calidad [7].  
reacciones de precipitación.  
Linealidad. De acuerdo a la AOAC- PVMC se  
Cadmio. El cadmio es un elemento que se deduce que el intervalo lineal es el intervalo de  
encuentra en forma natural en la corteza concentraciones del analito dentro del cual los  
terrestre. El cadmio puro es un metal suave y de resultados de prueba obtenidos por el método  
color blanco plateado. Por lo general, el cadmio son proporcionales a la concentración del  
no se encuentra en el ambiente como un analito [14].  
metal puro, sino como un mineral combinado  
con otros elementos como el oxígeno (óxido Límite de confianza de la curva. Son límites que  
de cadmio), el cloro (cloruro de cadmio) o el incluyen un grado de confianza previamente  
azufre (sulfato o sulfuro de cadmio). El cadmio asignado (nivel de confianza para la pendiente y  
es más abundante en la naturaleza en la forma la ordenada).  
de óxidos complejos, sulfuros y carbonatos en  
el zinc, el plomo y las minas de cobre. En raras Límite de detección (LD). Se puede definir como  
ocasiones se encuentra en grandes canꢀdades la concentración más baja de analito presente  
como cloruros y sulfatos [12].  
en una muestra que puede ser detectable [15].  
El límite de detección (LD) es la canꢀdad de  
Cacao. El término cacao representa analito que proporciona una señal y es igual a  
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tres veces el ruido de la media. Para algunos Reproducibilidad. Precisión bajo condiciones  
equipos se puede establecer que el LD es, de reproducibilidad, es decir, condiciones  
aproximadamente tres veces la desviación según las cuales los resultados de prueba se  
estándar.  
obꢀenen con el mismo método, sobre objetos  
Límite de cuanꢀꢁcación (LQ). Se puede de prueba idénꢀcos, en diferentes laboratorios,  
definir como la concentración más baja del por diferentes operadores, usando diferentes  
analito presente en una muestra que puede equipos [14].  
ser determinada con una precisión y exacꢀtud  
aceptables para las condiciones de trabajo [15]. Intervalo  
de  
trabajo.  
Este  
intervalo  
normalmente está comprendido entre el límite  
Precisión. Grado de concordancia entre los de cuanꢀficación y el valor asignado al mayor  
valores de una serie repeꢀda de ensayos, patrón uꢀlizado. Nótese que esto se refiere al  
uꢀlizando una muestra homogénea, bajo intervalo de concentraciones o a los valores de  
condiciones establecidas. Se puede medir por la propiedad relacionada, de las disoluciones  
el grado de reproducibilidad o repeꢀbilidad del medidas realmente más que de las muestras  
métodoanalíꢀco, siendousualmenteexpresadas originales [14].  
por la desviación estándar [16].  
Las medidas de precisión más comunes son la METODOLOGÍA  
“repeꢀbilidad” y la “reproducibilidad”. Éstas La invesꢀgación muestra la comparación de tres  
representan las dos medidas extremas de formas de extraer el cadmio de almendras de  
precisión que pueden obtenerse.  
cacao para ser analizado por espectrofotometría  
de absorción atómica por flama; estas técnicas  
Repeꢀbilidad. Según la ISO 3534-1 es la están basadas en la digesꢀón ácida de la  
precisión en condiciones de repeꢀbilidad, es muestra. Antes de ser analizadas las almendras  
decir, condiciones según las cuales los resultados son someꢀdas a un proceso de secado,  
independientes de una prueba se obꢀenen con descascarillado y molienda para obtener  
el mismo método, sobre objetos de prueba muestras de caracterísꢀcas homogéneas. En  
idénꢀcos, en el mismo laboratorio, por el mismo la Tabla 1 se describe el procedimiento de los  
operador, usando el mismo equipo y dentro de métodos de extracción evaluados.  
intervalos de ꢀempo cortos’.  
Tabla 1. Métodos de extracción  
Método extracción  
Principio  
Procedimiento  
En una cápsula de porcelana, pesar 5 gramos de cacao molido, llevar a  
la mufla a 800°C, obtener cenizas libres de parꢁculas. Adicionar 10 ml  
de ácido nítrico concentrado, llevar a la plancha de calentamiento hasta  
reducir el volumen. Filtrar y aforar con ácido nítrico al 1% (AGROCALIDAD,  
2012)  
Calcinación y digesꢀón con  
ácido nítrico al 1 %  
I
En un matraz, pesar 5 gramos de cacao molido, adicionar 25 ml de la  
solución nítrica-perclórica, reposar una hora, llevar a la plancha de  
calentamiento a ± 60°C por aproximadamente 4 a 5 horas hasta digesꢀón  
total. La digesꢀón estará completa cuando desaparezcan los vapores  
amarillos y haya formación de un líquido incoloro. Filtrar y aforar con  
agua ꢀpo I. (Mite et al., 2010)  
Digesꢀón con solución  
nítrica-perclórica  
II  
En un matraz pesar 5 gramos de cacao molido, adicionar 10 ml de agua  
ꢀpo I y 25 ml de agua regia obteniendo una pasta; dejar en reposo  
por 16 a 18 horas. Colocar en una plancha de calentamiento a ± 105  
°C por aproximadamente 3 horas, después de ese ꢀempo adicionar 10  
ml más de agua regia, conꢀnuar la digesꢀón por 2 horas más, agitar  
esporádicamente hasta que la muestra tenga la apariencia de una pasta  
de color amarrillo. Enfriar, filtrar y aforar con ácido nítrico al 1%.1  
III  
Digesꢀón con agua regia  
1
Metodología adaptada al Laboratorio de acuerdo a lo uꢀlizado por Francisco  
Mite, Manuel Carrillo y Wuellings Durango en “Avances del Monitoreo de  
Presencia de Cadmio en Almendras de Cacao, Suelos y Aguas en Ecuador”, 2010  
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Al finalizar cada uno de las técnicas de extracción  
se obtuvieron soluciones acuosas de cacao en  
las cuales se determinó la concentración de  
cadmio uꢀlizando una curva de calibración de  
25–250 ug/L a través de espectrofotometría de  
absorción atómica por llama.  
RESULTADOS  
Análisis estadísꢀco de los resultados  
Una vez obtenidos los resultados promedios, se  
puede observar la variación de la concentración  
de cadmio (mg/Kg) extraída según la técnica  
uꢀlizada. En la Figura 1 se muestra que existe  
una mayor extracción del analito al aplicar la  
técnica de extracción III.  
Figura 1. Resultados promedio obtenidos al emplear  
cada técnica de extracción  
Los datos obtenidos fueron comparados Tabla 2 se muestra que existe una diferencia  
estadísꢀcamente a través de un ANOVA. En la significaꢀva entre los resultados al aplicar cada  
una de las técnicas a la muestra de ensayo.  
Tabla 2. Resumen de ANOVA  
Diferencia  
Cuadrados  
Medios  
F.tab  
Origen de la  
Varianza  
Suma de  
Cuadrados  
Grados de  
Libertad  
F.cal  
5%  
1%  
Total  
0,7315  
0,7297  
0,0018  
8
2
6
Tratamientos  
Error  
0,3648  
1228,94**  
5.14  
10.92  
2,97x10-4  
Tabla 3. Resultados presentados por laboratorios  
Para poder determinar que técnica fue la  
adecuada para la extracción de cadmio de  
las almendras de cacao, se tomaron como  
valor referencia los resultados emiꢀdos por  
dos laboratorios externos acreditados en el  
parámetro de cadmio de acuerdo a la Norma  
ISO/EC 17025. A conꢀnuación, en la Tabla 3  
se muestran los resultados emiꢀdos por los  
laboratorios externos (L1, L2) y los obtenidos  
durante el ensayo aplicando la técnica III (L3).  
Laboratorios  
L1  
L2  
L3  
R1  
0.73  
0.69  
0.67  
0.70  
0.75  
0.77  
0.73  
0.75  
0.73  
0.79  
0.79  
0.77  
R2  
R3  
Promedio  
L3 datos obtenidos con la técnica III  
diferencia significaꢀva entre los resultados  
obtenidos por los laboratorios, es decir  
estadísꢀcamente sus resultados son semejantes.  
LosresultadosdelANOVAdelaIntercomparación  
mostrados en la Tabla 4, indican que no existe  
Tabla 4. Resumen ANOVA para Intercomparación  
Diferencia  
Cuadrados  
Medios  
F.tab  
Origen de la  
Varianza  
Suma de  
Cuadrados  
Grados de  
Libertad  
F.cal  
5%  
1%  
Total  
0.0117  
0.0066  
0.0050  
8
2
6
Tratamientos  
Error  
0.0033  
0.0008  
3.94ns  
5.14  
10.92  
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Una vez confirmado estadísꢀcamente que la Límite de confianza de la curva. Los límites  
Técnica III es la apropiada para la extracción de de confianza superior e inferior de la curva se  
cadmio en almendras de cacao, se procedió a muestran en la Tabla 6.  
Tabla 6. Intervalo o región de confianza de la curva de  
determinar algunos parámetros necesarios para  
comprobar que los resultados obtenidos por el  
calibración  
método son fiables y adecuados para nuestro  
propósito.  
C (ug/L)  
0
Lsup  
Linf  
0,00458  
0,01998  
0,02923  
0,04155  
0,06619  
0,09700  
0,15862  
0,0005  
0,0151  
0,0238  
0,0354  
0,0587  
0,0878  
0,1461  
25  
Parámetros estadísꢀcos para el método  
40  
Linealidad. Se uꢀlizó una curva de calibración  
de 6 niveles. En la Tabla 5 se muestran las  
concentraciones de cadmio uꢀlizadas para la  
determinación de la linealidad, y en la Figura  
2 se presenta la gráfica obtenida al relacionar  
la concentración de cada de los puntos de  
calibración con la absorbancia obtenida.  
60  
100  
150  
250  
Límite de detección y límite de cuanꢀficación.  
El límite de detección (LOD) es de 7 ug/L,  
concentración mínima en la muestra que  
puede ser detectada con el equipo. El límite de  
cuanꢀficación (LOQ) es de 23.33 ug/L, a parꢀr  
de este valor se puede cuanꢀficar con veracidad  
y precisión aceptable.  
Tabla 5. Concentración de la curva de calibración  
Concentración  
L1  
(ppb)  
0.00  
25.00  
40.00  
60.00  
100.00  
150.00  
0
0,0183  
0,0278  
0,0393  
0,0628  
0,0923  
Precisión. Los resultados obtenidos para evaluar  
la precisión dentro de los grupos (dispersión)  
para comprobar la repeꢀbilidad de los resultados  
y entre los grupos (tratamientos) de repeꢀción  
para comprobar la reproducibilidad se muestran  
en la Tabla 7.  
A parꢀr de los datos obtenidos de la tabla  
anterior se calcularon las desviaciones estándar  
de repeꢀbilidad (Sr) y desviación estándar de  
reproducibilidad (SR) mostrada en la Tabla 8.  
Figura 2. Curva de calibración. Concentración vs  
Absorbancia  
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Tabla 7. ANOVA del método comparándola con el valor estadístico de Fisher (F).  
Diferencia  
Cuadrados  
Medios  
F.tab  
Origen de la  
Varianza  
Suma de  
Cuadrados  
Grados de  
Libertad  
F.cal  
5%  
4.26  
1%  
Total  
0.0066  
0.0025  
0.0041  
0.0214  
11  
2
Tratamientos  
Error  
0.0012  
2.74ns  
8.02  
9
SL2 =  
4.6 x10-4  
2.01 x10-4  
Sr =  
SR=  
0.0256  
Tabla 8. Desviación estándar y coeficiente de variación de la reproducibilidad y repetibilidad  
Concentración  
Sr (mg/Kg)  
% Sr  
SR (mg/Kg)  
%SR  
(mg/Kg)  
Muestra  
0.753  
0.0214  
2.84  
0,0256  
3.39  
Prueba Inter Laboratorio  
del proyecto “Reacꢀvación del café y cacao  
En el año 2019 el Insꢀtuto Francés de Nacional fino de aroma” en el cual parꢀciparon  
Invesꢀgación y Desarrollo IRD, en conjunto diez laboratorios incluido el Laboratorio de  
de CEFA y el Ministerio de Agricultura realiza Bromatología de la AGROCALIDAD2; el mismo  
una prueba Inter laboratorio como parte que obtuvo resultados saꢀsfactorios en su  
parꢀcipación. Ver Tablas 9 y 10.  
Tabla 9. Resultados de comparación inter-laboratorio de la muestra 1 de cacao en polvo  
Fuente: [17].  
Tabla 10. Resultados de comparación inter-laboratorio de la muestra 2 de cacao en polvo  
Fuente: [17].  
2
L1 – Laboratorio Bromatologia de AGROCALIDAD  
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CONCLUSIONES  
La determinación de cadmio en granos de cacao  
Revista Ciencia UNEMI. 2016; 9(18): 45-  
55  
es muy importante para la economía del país 4. INEN. (2019). Material de referencia  
ya que Ecuador es exportador de cacao fino  
de aroma, por lo tanto, se deben cumplir las  
de Cadmio en Cacao en proceso de  
Certificación por el INEN.  
especificaciones de normaꢀvas reglamentarias 5. Mite, F., Carrillo, M., & Durando, W.  
con lo cual se brindará la confianza necesaria  
para la apertura de mercados internacionales.  
Al estudiar el efecto que ꢀenen cada una de  
las técnicas de extracción sobre las almendras  
de cacao, se estableció que la técnica de  
(2010). Avances del monitoreo de  
presencia de cadmio en almendras de  
cacao, suelos y aguas de ecuador. XII  
Congreso Ecuatoriano de la Ciencia del  
suelo.  
extracción III, la cual uꢀliza agua regia, es la 6. Nr, S., Nierensch, M., Bundesinstitut,  
apropiada para determinar cadmio uꢀlizando  
espectrofotometría de absorción atómica por  
llama.  
La intercomparación para el análisis de cadmio  
con el método seleccionado en el laboratorio de  
prueba y los dos laboratorios acreditados, arrojó  
D., Bestandteile, W., Schokolade, B.,  
Tolerable, P., Intake, W., Bfr, D., Ii, V.,  
Generaldirektion, B. D., & Sanco, D.  
G. BfR schlägt die Einführung eines  
Höchstgehalts für Cadmium in Schokolade  
vor. 2007; (015): 1–18).  
los siguientes resultados: L1 con un promedio 7. D.A. Skoog, F.J. Holler, T.A. Nieman.  
de 0.70 mg/Kg, L2 0.75 mg/Kg y el laboratorio  
de prueba L3 0.77 mg/Kg, de cuyo análisis de  
varianza se obtuvo una Fcal menor que la Ftab,  
Principios de Análisis Instrumental.  
5ª edición. Editorial McGraw Hill  
Interamericana, 2000.  
permiꢀendo concluir que estadísꢀcamente sus 8. Harris, D. (2007). Analisis quimico  
resultados no difieren significaꢀvamente.  
La estandarización del método conseguirá dar  
cuantitativo/  
Analysis (Spanish Edition).  
Quantative  
Chemistry  
seguridad a los exportadores ecuatorianos de 9. Beccaglia AM. Instructivo de preparación,  
que los resultados son fiables y no se produzcan  
rechazos al llegar el cacao a su desꢀno.  
El ensayo inter-laboratorio realizado en el  
año 2019 arroja resultados saꢀsfactorios,  
demostrando que el método genera resultados  
fiables para el uso previsto.  
digestión y preservación de muestras  
(aguas, efluentes, alimento y suelos) para  
análisis de metales por absorción atómica.  
VI Congreso Virtual Iberoamericano  
Gestión de Calidad en Laboratorios. 2010  
10. Brown C. Organic Reaction Mechanisms.  
Estados Unidos: John Wiley & Sons  
Ltd.1977  
REFERENCIAS  
1. Cobos C. Propuesta de un plan de 11. Hinkamp D. (2014). WebAcademia.  
exportación de chocolate con macadamia 12. ATSRD. Resumen de Salud Pública  
al mercado alemán. Quito: Universidad  
Internacional del Ecuador. 2019  
Cadmio. In Medicina. 1999. Disponible  
en: www.atsdr.cdc.gov/es  
2. Ministerio de Agricultura y Ganadería. 13. Braudeau, J. Cacao. Técnicas Agrícolas y  
Ecuador es el primer exportador de  
cacao en grano de América. Disponible  
Producciones. Barcelona-España. 1970.  
p. 299.  
en:  
https://www.agricultura.gob.ec/ 14. Magnusson B. y Örnemark U. (eds.).  
ecuador-es-el-primer-exportador-de-  
cacao-en-grano-de-america/  
Eurachem Guide: The Fitness for Purpose  
of Analytical Methods – A Laboratory  
Guide to Method Validation and Related  
Topics, (2nd ed. 2014).  
3. León-Villamar, F., Calderón-Salazar, J.,  
Mayorga-Quinteros, E. Estrategias para  
el cultivo, comercialización y exportación 15. Morante Zarcero, S. (2007). Desarrollo  
del cacao fino de aroma en Ecuador.  
de métodos analíticos para la separación  
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Volumen. 5, Nº 8, junio - noviembre 2021, pp. 62 - 71  
quiral y su aplicación al estudio de  
Acreditación Ecuatoriano OAE. 2011  
procesos de síntesis asimétrica. Madrid, 17. Laurence M. (2019). Informe de  
España: Dykinson. 2007  
16. Lemos, C. (2011). CR GA09 Criterios  
Actividades y Resultados. Taller teórico-  
práctico para optimizar procedimientos  
analíticos de cadmio en muestras de  
Generales  
R00  
Acreditación  
de  
Laboratorios Clínicos. Organismo de  
cacao. Ministerio de Agricultura  
Ganadería – MAG.  
y
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