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Chicaiza Coba y Fernández Rivero. Extracción y cuancación de polifenoles.
Extracción y cuancación de polifenoles en
Plantago major L. y Buddleja globosa
Extracon and quancaon of polyphenols in
Plantago major L. and Buddleja globosa
Resumen
Los anoxidantes presentan un papel importante en la prevención de enfermedades, diversos estudios han demostrado que las
plantas y sus extractos son efecvos para proteger contra el daño causado por los radicales libres. Se ha evidenciado que especies
como Plantago (llantén) y Buddleja (maco) presentan acvidad anoxidante debido a la presencia de compuestos fenólicos.
Este estudio tuvo como objevo determinar la inuencia del material vegetal sobre la concentración de polifenoles presentes
en los extractos vegetales. Se recolectaron las hojas y raíces de Buddleja y Plantago, se ulizó el etanol al 70% como disolvente
en la extracción por maceración. Se determinó la concentración de polifenoles totales mediante el método de Folin-Ciocalteu.
A través de un análisis de varianza, se obtuvo que tanto la planta, como sus partes, presentaron un efecto signicavo sobre la
concentración de polifenoles, alcanzando el extracto proveniente de las hojas de Buddleja el mayor contenido de polifenoles
(15,930 ± 1,375 mg GAE/g PS). Se determinó mediante el método colorimétrico con cloruro de aluminio el contenido de avo-
noides totales correspondiéndose con el extracto de las hojas de Buddleja (2,577 ± 0,025 mg QE/g PS). La capacidad anoxidante
fue determinada mediante el método de DPPH, presentando una concentración equivalente de Trolox de 12,463 ± 0,067 µmol/g.
Palabras claves: polifenoles; Plantago major L.; Buddleja globosa; maceración.
Abstract
Anoxidants play an important role in disease prevenon. Various studies have shown that plants and their extracts are eec-
ve in protecng against damage caused by free radicals. It has been demonstrated that species such as Plantago and Budd-
leja exhibit anoxidant acvity due to the presence of phenolic compounds. This study aimed to determine the inuence of
plant material on the concentraon of polyphenols present in plant extracts. Leaves and roots of Buddleja and Plantago were
collected, and 70% ethanol was used as a solvent in the maceraon extracon method. The total polyphenol concentraon
was determined using the Folin-Ciocalteu method. Through analysis of variance, it was found that both the plant and its parts
had a signicant eect on the polyphenol concentraon, with the extract from Buddleja leaves showing the highest polyphe-
nol content (15.930 ± 1.375 mg GAE/g DW). The total avonoid content was determined using the colorimetric method with
aluminum chloride, corresponding to the extract from Buddleja leaves (2.577 ± 0.025 mg QE/g DW). Anoxidant capacity was
determined using the DPPH method, with an equivalent concentraon of Trolox of 12.463 ± 0.067 µmol/g.
Keywords: polyphenols; Plantago major L.; Buddleja globose; maceraon.
Sebasán Nicolás Chicaiza Coba
1
; Danae Fernández Rivero
2*
(Recibido: marzo 26, 2025; Aceptado: abril 29, 2025)
hps://doi.org/10.29076/issn.2602-8360vol9iss16.2025pp140-145p
1 Universidad Técnica de Ambato, Ecuador. Email: schicaiza7228@uta.edu.ec. ORCID: hps://orcid.org/0009-0001-4377-0406
2 Universidad Técnica de Ambato, Ecuador. Email: da.fernandez@uta.edu.ec. ORCID: hps://orcid.org/0000-0002-7530-7467.
* Autor de correspondencia
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Chicaiza Coba y Fernández Rivero. Extracción y cuancación de polifenoles.
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INTRODUCCIÓN
En la actualidad enen un papel muy importante
los anoxidantes naturales para el bienestar
humano. Durante siglos, las comunidades se
han beneciado de estos compuestos para
tratar diversas enfermedades y mejorar su salud
(1). Los anoxidantes son fundamentales en la
prevención de enfermedades. Las plantas y sus
extractos se ulizan con nes medicinales, ya
que protegen del daño causado por los radicales
libres. Al igual que las plantas, nuestro organismo
emplea enzimas anoxidantes (superóxido
dismutasa, catalasa y peroxidasa) y compuestos
como la vitamina C, polifenoles y carotenoides
para reparar las células y el material genéco
(2). Por ello, se ha invesgado la importancia
de plantas con alto contenido de compuestos
anoxidantes para la obtención de ingredientes
acvos que pueden ser úles en la elaboración
de formas farmacéucas (3).
Ecuador es uno de los países con mayor
diversidad botánica contando con 16200
especies de plantas idencadas, entre estas
se encuentran plantas de uso ornamental,
alimencio y medicinal. Además, se ha
evidenciado en diversos estudios que las
especies del género Plantago (llantén) y Buddleja
(maco) presentan acvidad anoxidante en
modelos experimentales debido a la presencia
de compuestos fenólicos (4). Invesgaciones
realizadas en el llantén mostró la presencia de
fenoles, taninos y avonoides, de este úlmo
se han reportado concentraciones en el rango
de 3 a 6 mg equivalentes de quercena por
gramo de extracto seco (5). Adicionalmente en
la especie Buddleja globosa se ha obtenido un
alto contenido de compuestos bioacvos que
incluyen polifenoles, avonoides, alcaloides,
saponinas, taninos, esteroides y aceites
esenciales (6). Además, se ha determinado en
sus hojas una concentración de avonoides
totales en el rango de 10 a 20 mg equivalentes
de quercena por gramo de extracto seco (7).
Para la obtención de compuestos fenólicos
provenientes de las plantas se han ulizado
diversos métodos de extracción, un ejemplo
es la extracción sólido líquido que se basa en
la transferencia de compuestos solubles desde
una matriz sólida hacia un disolvente líquido.
Con el objevo de aumentar los rendimientos
del proceso de extracción se deben considerar
diversos factores como: la naturaleza del
disolvente, la relación material vegetal/volumen
de disolvente, la temperatura y el empo de
extracción (1).
Por tanto, la extracción de polifenoles a parr de
las hojas y raíces de estas dos especies vegetales
podría ser una alternava para la obtención de
ingredientes acvos naturales que pudieran
ulizarse en invesgaciones futuras para la
elaboración de formas farmacéucas.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se recolectaron hojas y raíces de las plantas de
maco y llantén, se enjuagaron con abundante
agua deslada y se secaron en un deshidratador
a la temperatura de 50 ºC durante 24 horas,
se trituraron y se almacenaron en bolsas de
polieleno de alta densidad-aluminio (8).
Se ulizó como disolvente el etanol al 70%
en una relación material vegetal/volumen de
disolvente 1 en 10, ulizando la maceración
como método de extracción. La mezcla se dejó
reposar durante 8 días en un ambiente sin luz,
con agitación ocasional. El producto nal se
ltró y se almacenó a la temperatura de 2 a 8
o
C (9).
Ensayos realizados
1. Determinación de la concentración de fenoles
totales
La cuancación de fenoles totales se realizó
mediante el método de Folin-Ciocalteu. Se
empleó una placa de 96 pocillos, donde se
colocó 100 μL del extracto, 4,5 mL de agua
deslada y 100 μL del reacvo Folin-Ciocalteu
(10). Después de 3 minutos, se agregó 300 μL de
la solución de carbonato de sodio al 7 % (p/v).
Se incubó a temperatura ambiente durante 120
minutos en ausencia de la luz. La absorbancia se
determinó a la longitud de onda de 760 nm en
un espectrómetro (Fisher Scienc, Finlandia).
Se elaboró una curva estándar con soluciones
de ácido gálico (GAE) entre 7,8 a 500 mg/L. La
concentración de fenoles totales se expresó
como equivalente de miligramos de ácido
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Chicaiza Coba y Fernández Rivero. Extracción y cuancación de polifenoles.
gálico por gramo de peso seco de la muestra
(mg GAE/g PS) (11), el valor de concentración
equivalente de ácido gálico fue obtenido a parr
de la ecuación de regresión lineal de la curva
de calibración de ácido gálico y relacionado con
los gramos de material vegetal ulizado en la
extracción.
2. Determinación de la concentración de
avonoides totales
Para determinar el contenido de avonoides
totales en los extractos, se empleó el método
colorimétrico con cloruro de aluminio. Se
combinó 500 μL del extracto concentrado con
1,5 mL de metanol al 95%, seguido de 100 μL
de una solución de cloruro de aluminio al 10
% (p/v), 100 uL de acetato de potasio 1M y
2,8 mL de agua deslada. La mezcla se incubó
a temperatura ambiente durante 30 minutos.
Posteriormente, se midió la absorbancia a una
longitud de onda de 415 nm. Se elaboró la
curva estándar de calibración con soluciones
de quercena (QE) en un rango entre 7,8 a 100
mg/L. El contenido de avonoides totales se
expresa como miligramos de quercena por
gramo de peso seco de la muestra (mg QE/g PS)
(12).
3. Determinación de la acvidad anoxidante de
los extractos.
Se ulizó el método DPPH, este es un método
químico que se basa en la capacidad de los
anoxidantes para neutralizar el radical libre
estable DPPH. En una placa de 96 pocillos
se colocaron 20 µL del extracto diluido o la
solución estándar, con 180 µL del reacvo DPPH
(Sigma-Aldrich, USA) disuelto en metanol-agua
en una proporción (80:20) a una concentración
de 150 µmol/L y se agitó por 60segundos. Se
incubó la placa por 40 minutos en ausencia de
la luz a temperatura ambiente, posteriormente
se determinó la absorbancia a 515 nm a la
temperatura de 25 °C en el espectrofotómetro
(Fisher Scienc, Finlandia).
La capacidad anoxidante se calculó como
el porcentaje de inhibición del radical DPPH
(ecuación 1), a parr de los valores de
absorbancia obtenida de la muestra (Abs
4. Análisis de datos
Los datos fueron analizados mediante Minitab
18 Stascal Soware (Pensilvania, Estados
Unidos) a través de un diseño experimental 2
2
.
Se realizó un análisis de varianza para determinar
si exiseron inuencias signicavas entre los
factores: pos de planta y parte de la planta, así
como sus interacciones sobre la concentración
de polifenoles (mg GAE/g PS). Se consideraron
inuencias signicavas un valor p < 0,05.
RESULTADOS
La cuancación de los componentes fenólicos
totales (TPC) presentes en los extractos de las
raíces y hojas de ambas plantas, se determinaron
a parr de la ecuación de regresión lineal
y=0.001x+0.0651 (R
2
=0.9957) obtenida de la
curva estándar de calibración de ácido gálico.
Los resultados de TPC se muestran en la Tabla
1, observándose que en las hojas de ambas
plantas se encontraron los valores más elevados
de polifenoles.
El análisis de varianza permió evaluar los
efectos principales de cada factor como su
posible interacción. Los resultados del ANOVA
indicaron si las variaciones en la concentración de
polifenoles (mg GAE/g PS), se deben a los factores
A (po de planta) y B (parte de la planta), ya sea
individualmente o en combinación, y si estas
diferencias son estadíscamente signicavas.
En la Figura 1 se muestran los resultados de las
herramientas grácas: Diagrama de Pareto y
Gráco de efectos principales.
Tabla 1. Concentración de TPC en los extractos de
raíces y hojas de ambas plantas
Extractos TPC (mg GAE/g PS)
Maco hoja 15,930 ± 1,375
Llantén hoja 9,209 ± 1,108
Maco raíz 2,400 ± 0,026
Llantén raíz 2,682 ± 0,182
muestra) y el control (Abs control), con la
elaboración previa de una curva estándar de
Trolox (50-500 µmol/L) (13).
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Chicaiza Coba y Fernández Rivero. Extracción y cuancación de polifenoles.
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Figura 1. Gráficos obtenidos del análisis estadístico
El gráco de Pareto muestra que los factores
analizados, así como su interacción inuyeron
signicavamente sobre la concentración de
polifenoles (mg GAE/g PS). Muestra que el
factor más relevante es la parte de la planta
(B), ya que su efecto estandarizado supera
signicavamente el valor críco (2.31). En el
gráco de efectos principales se evidencian los
efectos principales de cada factor, destacándose
que, en relación con los pos de planta, el
maco obtuvo un mayor contenido fenólico
en comparación con el llantén. Se observa que
con las hojas de maco se obtuvo el mayor
porcentaje de eciencia de extracción (15,930 ±
1,375 mg GAE/g PS).
La cuancación del contenido total de
avonoides (TFC) presentes en los extractos de
raíces y hojas de ambas plantas, se determinaron
de acuerdo con la ecuación de regresión
lineal y=0.0076x+0.0918 obtenida de la curva
estándar de calibración de quercena, con un
coeciente de determinación R
2
=0.9924. En la
Tabla 2 se muestran los valores obtenidos de
la cuancación de avonoides, observándose
que en los extractos provenientes de las hojas
se obtuvieron los mayores valores, similar a lo
observado en el contenido de polifenoles (Tabla
1). Se debe considerar que los avonoides son
un grupo de compuestos polifenólicos presentes
en las plantas, los cuales cumplen diversas
funciones como protección del daño producido
por la luz ultravioleta y otros agentes oxidantes
(14).
De la curva de calibración realizada con Trolox
se obtuvo la siguiente ecuación de regresión
lineal: y=0.1561x+4.5179 (R
2
=0.9961). El
extracto elaborado con las hojas de maco
presentó un porcentaje de inhibición del radical
DPPH de 80.76 ± 0.399 lo que equivale a una
concentración equivalente de Trolox de 12.463
± 0.067 µmol/g.
DISCUSIÓN
El mayor contenido de polifenoles y avonoides
se obtuvo en la hoja de maco (15,930 ±
1,375 mg GAE/g PS y 2,577 ± 0,025 mg QE/g
PS respecvamente) si se compara con los
resultados obtenidos por Yarleque et al (15)
estos valores fueron superiores (11,65 ± 0,037
mg/g para fenoles totales y 0,30 ± 0,010 mg/g
para avonoides), a pesar de que en ambas
invesgaciones se ulizó la maceración como
método de extracción. Sin embargo, se varió la
concentración del disolvente, en otros trabajos
se ulizó como disolvente el etanol al 96% (15) y
en esta invesgación se empleó etanol al 70%, en
la literatura se menciona que la mezcla etanol-
agua favorece la extracción de polifenoles y por
esta razón la acvidad anoxidante (16).
Además, los extractos obtenidos de las hojas
de ambas plantas presentaron un mayor
contenido de polifenoles y por consiguiente de
avonoides, en comparación con los extractos
procedentes de las raíces, ya que las hojas
están expuestas a la luz solar. Los polifenoles
actúan como protectores naturales contra el
Tabla 2. Concentración de TFC en los extractos de
raíces y hojas de ambas plantas
Extractos TPC (mg QE/g PS)
Maco hoja 2,577 ± 0,025
Llantén hoja 2,319 ± 0,072
Maco raíz 0,358 ± 0,004
Llantén raíz 0,657 ± 0,083
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Chicaiza Coba y Fernández Rivero. Extracción y cuancación de polifenoles.
daño causado por la radiación ultravioleta, por
lo tanto, las hojas enden a acumular mayores
concentraciones de polifenoles para proteger
sus tejidos fotosintécos (11).
Se corroboró la acvidad anoxidante del
extracto vegetal obteniendo un porcentaje de
inhibición del radical DPPH de 80.76 ± 0.399, este
valor concuerda con los resultados presentados
en otras invesgaciones al evaluar diferentes
especies del género Plantago encontrándose
valores desde el 21,56 ± 1,95% hasta 94,17 ±
0,36% (17). Esta acvidad anoxidante se debe
a la presencia de diferentes pos de avonoides
en el extracto vegetal de Plantago major L. (18).
Es importante destacar que la acvidad
anoxidante está directamente relacionada con
la concentración de polifenoles, es decir, a mayor
concentración, mayor acvidad anoxidante,
siempre que los polifenoles conserven su
acvidad biológica. Una mayor eciencia en la
extracción podría resultar en un extracto con
una acvidad anoxidante superior.
CONCLUSIONES
Los resultados de esta invesgación sugieren
que el extracto obtenido a parr de las hojas de
Plantago major L. presentó el mayor contenido
de polifenoles y avonoides, lo que favoreció su
acvidad anoxidante con una concentración
equivalente de Trolox de 12,463 ± 0,067 µmol/g
de material vegetal. Se pudiera considerar su
uso como principio acvo en la elaboración
de formas farmacéucas, no obstante, se
requiere de la aplicación de otros métodos que
demuestren su acvidad anoxidante, así como
su estabilidad.
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